| 适用范围 | 试剂 |
|---|---|
| 使用方法 | 1. MSC 成骨诱导完全培养基配制：室温融化成骨诱导添加物 B，将融化的溶液加入人间充质干细胞成骨诱导基础培养基中，充分混匀，2-8 ℃保存，有效期 1 个月。 2. 培养皿处理：加适量包被溶液到培养器皿中，轻轻摇动使其覆盖整个培养器皿底面，室温静置30-60分钟。弃去溶液 ，室温晾干（包被液使用前必须进行室温复温。建议使用六孔板，每孔加包被溶液1 ml）。 3. 准备所需诱导分化的 MSC，当细胞融合达 85%左右时，用消化液消化细胞，并用 MSC 完全培养基重悬（MSC 完全培养基需自备）。 4. 按照2×104 cells/cm2的密度将细胞接种于已包被处理的六孔板中，每孔MSC完全培养基2 ml，37℃、5%CO2培养箱中培养（细胞密度为该试剂盒的标准密度，可根据实验室情况进行调整）。 5. 当细胞融合达60%时，弃去培养上清，每孔添加MSC成骨诱导完全培养基2 ml/孔，37℃、5%CO2培养箱中培养。 6. 每3天更换新鲜的MSC成骨诱导完全培养基，持续培养2-4周。细胞状态良好一般5天后培养液出现浑浊，钙浑浊为钙开始沉积，此时换液应尽量轻柔，避免将沉积的钙弃掉；7-10天左右出现钙沉积。一般2周内出现较大的较厚的钙沉积，透光性变差。有些细胞钙沉积出现较晚，一般不超过3周，超过3周未出现明显沉积，请注意分析操作步骤与其他原因。可根据具体实验需求选择终止时间，但不易超过4周（具体时间请根据自己实验室细胞等条件自行确定）。 7. 诱导培养结束时，弃去培养上清，DPBS洗细胞两次，4%中性多聚甲醛溶液2 ml/孔室温固定细胞20分钟（培养结束时或中途可以选择其他检测方法，如基因表达检测等）。 8. 弃去固定液，DPBS洗2次，加入茜素红染液1 ml/孔染色15分钟。 9. 弃去茜素红染液，DPBS洗3次，添加新鲜DPBS。 10. 显微镜下观察并拍照。 11. 结果判定：按照程序操作完毕，低倍镜下观察可见红色着色点，此处为钙结节，说明实验所用的MSC具有成骨能力。否则，所使用的MSC无成骨能力。 |
| 注意事项 | 1、 成骨诱导后细胞易脱壁，换液时完全培养基必须经室温复温 30 分钟。添加培养基时动作要轻柔，沿培养器皿侧壁缓缓加入，切记避免吹起细胞。 2、 染色过程中一定要避免组织细胞被风干，风干会影响显微观察效果。 3、 如果试剂外包装管出现裂缝，应立即停止使用。 4、 应严格按照贮存要求贮存，避免反复冻融。 5、 操作过程应在无菌环境下进行。必须保证操作过程中使用的所有容器及所有直接接触细胞液的器具严格无菌。 |
| 声明 | 本产品仅适应于科学研究与开发相关用途，不用于诊断和治疗。 |
| 保存条件 | 参考说明书 |
间充质干细胞（MSC）具有多向分化的潜能，在一定条件下可以体外诱导分化为脂肪细胞、 成骨细胞、成软骨细胞，是 MSC 鉴定的必检项目，在多种组织来源和制作方法的 MSC 药品 质量控制中，成骨、成脂、成软骨也是必检指标。BDBIO 成脂诱导分化染色试剂盒可用于鉴 定人 MSC 是否具有成脂分化能力，满足 MSC 质量控制的要求，此外培养基还可用于研究诱 导分化过程中的其他检测，如 mRNA 检测、lncRNA 检测、microRNA 检测、蛋白表达检测、 油脂定量检测、免疫组化检测等。本产品诱导 MSC 分化为的脂肪细胞多为多泡脂肪细胞样， 当脂肪滴融合过大时容易脱壁，难见单泡脂肪细胞样，用于脂肪研究可斟酌使用本产品。
适用于多种来源的人间充质干细胞培养、生长扩增、传代、冻存及诱导分化。
| 产品货号 | 产品名称 | 产品描述 |
|---|---|---|
| S101-500 | MSC无血清基础培养基 | 适用于多种来源的人间充质干细胞生长与扩增 |
| S102-025 | 干细胞培养基添加剂 | 适用于多种来源的人间充质干细胞生长与扩增 |
| S300-100 | 血小板裂解物 | 适用于多种来源的人间充质干细胞生长与扩增 |
| A309-100 | 重组胰酶 | 细胞消化温和，表型维持良好 |
| A402-100 | 无血清干细胞专用冻存液 | 无动物源成分，细胞复苏、冻存活率高 |
| A403-100 | 无血清干细胞专用冻存液（无酚红） | 无动物源成分，细胞复苏、冻存活率高 |
| S1011-100 | MSC促贴壁试剂 | 即用型溶液，适用于MSC的促贴壁研究 |
| S1021-KIT | 成骨诱导分化染色试剂盒 | 诱导分化与染色效果稳定 |
| S1022-KIT | 成软骨诱导分化染色试剂盒 | 诱导分化与染色效果稳定 |
| S1023-KIT | 成脂诱导分化染色试剂盒 | 诱导分化与染色效果稳定 |
